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細(xì)胞液氮保存

液氮,液態(tài)的氮?dú)?。是惰性的,無色,無臭,無腐蝕性,不可燃,溫度極低,在常壓下,液氮溫度為-196℃,最開始使用主要是在工業(yè)生產(chǎn)中進(jìn)行冷凍處理,或作為深度制冷劑使用,由于其化學(xué)惰性,可以直接和生物組織接觸,立即冷凍而不會破壞生物活性。細(xì)胞儲存的液氮中就是利用了液氮的惰性,使得細(xì)胞在超低溫環(huán)境下仍保有高活性。

 

細(xì)胞放入液氮前,為防止細(xì)胞在低溫環(huán)境中破損,需要對細(xì)胞加入冷凍保護(hù)劑,進(jìn)行降溫處理。降溫過程中,應(yīng)把控梯度降溫,溫度降低過快、過慢都會對細(xì)胞造成損傷,通過緩慢的梯度降溫使溫度從常溫降到-86℃后,才可以轉(zhuǎn)入-196℃深低溫液氮中進(jìn)行長期凍存,保證細(xì)胞的活性。

 

在細(xì)胞凍存過程中,所有液氮罐都必須嚴(yán)格的監(jiān)控設(shè)備,對存儲罐中的液氮含量進(jìn)行24小時(shí)監(jiān)控,不定時(shí)不間斷補(bǔ)充液氮,確保液氮的含量維持正常水平,保證細(xì)胞細(xì)胞處于休眠狀態(tài),長期凍存。

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