細(xì)胞凍存,是指將細(xì)胞貯存在超低溫環(huán)境中,在需要的時(shí)候再進(jìn)行復(fù)蘇。
凍存原則為“慢凍”,即讓細(xì)胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。
如果直接將細(xì)胞懸液放在超低溫下快速冷凍,細(xì)胞會(huì)受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護(hù)劑(如DMSO、甘油)和在凍存盒中添加的異丙醇,都起到程序性降溫的作用。
DMSO能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞中,延緩溫度下降速度,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而起到保護(hù)細(xì)胞的作用。
需注意的是,DMSO溶于培養(yǎng)基時(shí),將釋放大量熱量,所以凍存液需提前配制,不能直接將DMSO加入含有細(xì)胞的培養(yǎng)基中,避免燙傷細(xì)胞。
另外,DMSO屬于致癌物質(zhì),使用時(shí)應(yīng)戴好手套,規(guī)范操作。
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