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外泌體鑒定

據(jù)國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(ISEV)在2014年的提議,外泌體鑒定分為三個層面:透射電鏡、Nanosight粒徑、蛋白標(biāo)志物。目前的常用的鑒定方法包括以下三種:

 

1. NTA粒徑分析

納米顆粒跟蹤分析對每個顆粒的布朗運(yùn)動進(jìn)行追蹤和分析,結(jié)合Stockes-Einstein方程式計算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度,檢測10nm–1000nm范圍內(nèi)的顆粒。

 

NTA技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一;相較于其他表征方式,NTA技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。

 

2. 外泌體電鏡分析

雙層囊膜結(jié)構(gòu)是外泌體重要標(biāo)志之一,但普通光學(xué)顯微鏡難以觀察到此種亞顯微結(jié)構(gòu)。而透射電子顯微鏡分辨率可達(dá)0.1-0.2nm,可將被觀察物體放大至數(shù)百萬倍,是外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀測的經(jīng)典方法。

 

3. 外泌體標(biāo)志物鑒定

通過對經(jīng)典文獻(xiàn)中普遍采用的抗體進(jìn)行驗證和挑選,優(yōu)選了多種外泌體標(biāo)志物抗體,如CD9、CD63、CD81、HSP70、TSG101、Alix等。

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