由于目前的分離技術(shù)是基于外泌體的大小、結(jié)構(gòu)和一些膜蛋白的捕獲,很難與其他囊泡和蛋白質(zhì)區(qū)分開,所以需要進行外泌體鑒定,外泌體的鑒定主要依賴形態(tài)學(xué)特征、顆粒大小、標志性蛋白等。
通過提取外泌體總蛋白,用Western Blot方法對目的蛋白進行相對定 量,了解其在外泌體中的富集情況,或通過特有外泌體標志物的 Western Blot鑒定說明樣本為外泌體。
根據(jù)國際囊泡協(xié)會規(guī)定,囊泡研究最小實驗要求,總體表征:至少要鑒定3個EVs陽性(至少有一個跨膜蛋白,一個細胞溶質(zhì)蛋白),1個EVs陰性蛋白標志物。