免疫細胞化學技術有多種染色方式,根據(jù)標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶標法、免疫鐵蛋白法及免疫膠體金法等。
其中,免疫熒光法結合激光共聚焦掃描顯微鏡技術,大大提高了檢測的分辨率,可以更為精確地檢測抗原的細胞定位及分布。
免疫熒光技術是先將已知的抗原或抗體標記上熒光素,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內(nèi)相應抗原(抗體)。
在細胞中形成的抗原抗體復合物上含有標記的熒光素,受激發(fā)光照射后,由低能態(tài)進入高能態(tài),而高能態(tài)的電子是不穩(wěn)定的,以輻射光量子的形式釋放能量后,再回到原來的低能態(tài)的過程中可以發(fā)出明亮的熒光,利用熒光顯微鏡可看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質和定位,并可以利用定量技術測定含量。